Ποια είναι τα συγκεκριμένα βήματα για την εκχύλιση DNA και την εκχύλιση RNA;

Η εκχύλιση του DNA, του RNA και των πρωτεϊνών είναι μια θεμελιώδης μέθοδος που χρησιμοποιείται στη μοριακή βιολογία. Αυτά τα βιομόρια μπορούν να απομονωθούν από οποιοδήποτε βιολογικό υλικό για επακόλουθη κατάντη επεξεργασία, αναλυτικούς ή προετοιμαστικούς σκοπούς. Στο παρελθόν, η διαδικασία εκχύλισης και καθαρισμού του νουκλεϊκού οξέος ήταν περίπλοκη, χρονοβόρα, επίπονη και η συνολική απόδοση ήταν περιορισμένη. Επί του παρόντος, υπάρχουν πολλές εξειδικευμένες μέθοδοι που διατίθενται για την εξαγωγή καθαρών βιομορίων, όπως πρωτόκολλα που βασίζονται σε διάλυμα και στήλες. Οι χειροκίνητες μέθοδοι έχουν προχωρήσει πολύ με την πάροδο του χρόνου και διάφορα εμπορικά προϊόντα περιλαμβάνουν πλήρη κιτ που περιέχουν τα περισσότερα από τα συστατικά που απαιτούνται για την απομόνωση των νουκλεϊνικών οξέων, αλλά τα περισσότερα από αυτά απαιτούν επαναλαμβανόμενα βήματα φυγοκέντρησης ακολουθούμενα από την απομάκρυνση του υπερκείμενου και πρόσθετη μηχανική επεξεργασία. Τα τελευταία χρόνια, υπήρξε αυξανόμενη ζήτηση για συστήματα αυτοματοποίησης που έχουν σχεδιαστεί για μεσαία και μεγάλα εργαστήρια. Είναι μια εναλλακτική λύση στις χειροκίνητες μεθόδους έντασης εργασίας.

• Ποια είναι η κύρια διαφορά μεταξύ της εκχύλισης DNA και της εκχύλισης RNA σε εκχυλίσματα DNA/RNA;

• Ποια είναι τα συγκεκριμένα βήματα για την εκχύλιση DNA και την εκχύλιση RNA;

• Ποια είναι η λειτουργία DNA/RNA εκχυλίσματος;

Ποια είναι η κύρια διαφορά μεταξύ της εκχύλισης DNA και της εκχύλισης RNA σε εκχυλίσματα DNA/RNA;

Η κύρια διαφορά μεταξύ της εκχύλισης DNA και του RNA είναι το επίπεδο pH. Απαιτείται ρΗ 8 για εκχύλιση DNA και απαιτείται ρΗ 4,7 για την εκχύλιση RNA. Το DNA τείνει να μετρώσει και να εισέλθει σε οργανική φάση σε όξινο ρΗ. Η αλκαλική υδρόλυση του RNA σε ένα αλκαλικό περιβάλλον εμφανίζεται λόγω του 2 'OH σε ριβόζη. Επίσης, υπάρχει μια άλλη σημαντική διαφορά. Η διαδικασία εκχύλισης RNA καθαρίζει το RNA, ενώ η διαδικασία εκχύλισης DNA καθαρίζει το DNA. Η διαδικασία εκχύλισης του DNA προχωρά μέσω αυτών των σταδίων - ο καταβολισμός των πρωτεϊνών μεμβράνης και των λιπιδίων, η κυτταρική λύση, η συσσωμάτωση των καταβολιτών σε συμπυκνωμένο διάλυμα αλατόνερου και η κατακρήμνιση του DNA παρουσία αιθανόλης. Αυτή η διαδικασία 3 σταδίων μπορεί να περιλαμβάνει δύο προαιρετικά βήματα

Ποια είναι τα συγκεκριμένα βήματα για την εκχύλιση DNA και την εκχύλιση RNA;

Η διαδικασία καθαρισμού RNA αποτελείται από 4 διαφορετικά στάδια - τη λύση των κυττάρων, την μετουσίωση της πρωτεΐνης, την απομόνωση RNA προσθέτοντας χλωροφόρμιο και φαινόλη και πλύση του σφαιριδίου με αιθανόλη. Η εκχύλιση RNA είναι ο καθαρισμός του RNA από βιολογικά δείγματα. Λόγω της παρουσίας ριβονουκλεάσης σε ιστούς και κύτταρα, η διαδικασία γίνεται περίπλοκη. Η χρήση της ριβονουκλεάσης μπορεί να αποικοδομήσει γρήγορα το RNA. Η συνηθισμένη μέθοδος στην εκχύλιση RNA είναι η εκχύλιση γουανιδίνης θειοκυανικής-φαινόλης-χλωροφορμικής. Με βάση την αρχή της φυγοκέντρησης και του διαχωρισμού φάσης

Η εκχύλιση DNA που περιλαμβάνει τον διαχωρισμό και τον καθαρισμό του DNA είναι μια χημική και φυσική διαδικασία. Τα δείγματα DNA μπορούν να ληφθούν από μπλοκ ιστών παραφίνης, αίμα, δείγματα ιστών (κατεψυγμένα) και εμφανίζονται στα ακόλουθα βήματα - λύση κυττάρων, απομόνωση DNA και βροχοπτώσεις Μόλις τα κύτταρα υποβληθούν σε λύση, τα συμπυκνωμένα διαλύματα άλατος προάγουν τη συσσωμάτωση των καταβολικών μορίων. Το διάλυμα στη συνέχεια φυγοκεντρείται για να διαχωριστεί το DNA από συστάδες συντριμμιών που διαφοροποιείται το DNA συνδυάζεται με άλατα και αντιδραστήρια που χρησιμοποιούνται στον κυτταρικό κύκλο και η βροχόπτωση αιθανόλης μπορεί να χρησιμοποιηθεί για περαιτέρω καθαρισμό.

Ποια είναι η λειτουργία DNA/RNA εκχυλίσματος;

Η λειτουργία ενός εκχυλίσματος DNA/RNA είναι να απομονώσει και να καθαρίσει το DNA και το RNA νουκλεϊνών οξέων από ένα δείγμα. Αυτό μπορεί να γίνει χρησιμοποιώντας μια ποικιλία μεθόδων, αλλά το πιο συνηθισμένο είναι να χρησιμοποιηθούν ένζυμα για να σπάσουν πρωτεΐνες και άλλα κυτταρικά συστατικά που μπορεί να υπάρχουν στο δείγμα. Μόλις απομονωθούν τα νουκλεϊνικά οξέα, μπορούν να χρησιμοποιηθούν για διάφορους σκοπούς, όπως η αλληλουχία ή η PCR.

Μέχρι το 2022, Bioteke έχει 51 εξουσιοδοτημένα διπλώματα ευρεσιτεχνίας και 12 πνευματικά δικαιώματα λογισμικού. Έχει περάσει πιστοποίηση συστήματος διαχείρισης ποιότητας ISO13485.