Τεχνολογικά περιεχόμενα σε σωλήνα δειγματοληψίας ιού

Η πανδημία Covid-19 συνεχίζει να επανεμφανίζεται στην Κίνα και καθιστά την κατάσταση της πρόληψης κρίσιμης σημασίας. Η ποιότητα των δοκιμών νουκλεϊκού οξέος για το Covid-19 παίζει σημαντικό ρόλο στην κατάσταση πρόληψης. Επί του παρόντος, οι σωλήνες δειγματοληψίας ιών απαιτούνται μόνο για τα ιατρικά αρχεία της κατηγορίας Ι, αλλά τα προϊόντα στην αγορά ποικίλλουν σε διαφορετικές ιδιότητες. Το επίκεντρο των παραμέτρων υποβολής προσφορών είναι επιφανειακή, συχνά επικεντρώνεται στο υλικό, τις προδιαγραφές και το μέγεθος των σωλήνων δειγματοληψίας, για αδρανοποιημένους σωλήνες δειγματοληψίας ή όχι, κλπ., Αγνοώντας πιο κρίσιμους δείκτες απόδοσης διατήρησης, γεγονός που αυξάνει τη δυσκολία εφαρμογής της δυναμικής μηδενικής πολιτικής και της αντιμετώπισης των επιπτώσεων των συνηθισμένων μέσων μέσω των στοχευμένων μέσων.

I. Τι είναι ένας σωλήνας δειγματοληψίας ιού και ποια είναι η λειτουργία του;

Οι σωλήνες δειγματοληψίας ιού είναι ένα είδος αναλώσιμων δοκιμών μίας χρήσης που χρησιμοποιούνται για τη διατήρηση της δραστηριότητας των δειγμάτων ιού ή για τη διατήρηση της σταθερότητας των νουκλεϊνικών οξέων σε δείγματα.

Ο σωλήνας δειγματοληψίας ιού αποτελείται γενικά από τρία μέρη: ένα στύγμα δειγματοληψίας μίας χρήσης, έναν σωλήνα δειγματοληψίας μίας χρήσης και μια βιολογική σακούλα ασφαλείας.

Το κόκκινο υγρό στον σωλήνα δειγματοληψίας του ιού είναι το διάλυμα διατήρησης του ιού, το οποίο μπορεί να χωριστεί σε αδρανοποιημένους και μη αδρανοποιημένους τύπους. Σύμφωνα με τις κατευθυντήριες γραμμές για την οργάνωση της περιφερειακής δοκιμής νουκλεϊκού οξέος Covid-19 (τρίτη έκδοση), προτείνεται να επιλεγεί ο σωλήνας δειγματοληψίας που περιέχει αλάτι γουανιδινίου (ισοθειοκυανικό γουανιδινίου ή υδροχλωρική γουανιδινίου κ.λπ.) ή επιφανειοδραστική ουσία. Έχει το πλεονέκτημα της ταχέως απενεργοποίησης του Covid-19 σε επιχρίσματα, αποτρέποντας τη διασταυρούμενη μόλυνση στην ανίχνευση, αναστέλλοντας τη δραστικότητα της νουκλεάσης και τη διατήρηση της σταθερότητας του ιικού νουκλεϊκού οξέος.

Ii. Τεχνολογικό περιεχόμενο και δείκτης απόδοσης του Swab

Το επιχρίσιμο δειγματοληψίας μίας χρήσης γίνεται με τεχνική συρρίκνωσης με νάιλον χνούδι ψεκασμένο κατακόρυφα πάνω σε κολλημένες ράβδους ABS. Με αυτό, τα επιθηλιακά απολεπισμένα κύτταρα από τις συλλεγμένες αλλοιώσεις του ασθενούς μπορούν να αποσπαστούν και να απελευθερωθούν στο διάλυμα συντήρησης για ανίχνευση ιού με πλήρη και ταχεία.

(1) Πλεονεκτήματα του επιχρίσματος νάιλον

Υψηλή προσρόφηση: Η απόδοση προσρόφησης του κυλίνδρου νάιλον είναι 20% -60% υψηλότερη από αυτή των άλλων επιχρισμάτων.

Γρήγορη συλλογή: Τα συρραφή νάιλον επιχρίσματα παίρνουν μόνο 3 δευτερόλεπτα έως 11 δευτερόλεπτα για να απορροφήσουν και να συλλέγουν δείγματα. ενώ τα βαμβακερά επιχρίσματα χρειάζονται έως και 15 δευτερόλεπτα σε 120 δευτερόλεπτα για να συλλέγουν δείγματα.

Υψηλή απελευθέρωση: Ένα εγχώριο πείραμα συλλογής παθογόνου βρήκε ότι η αποδοτικότητα απελευθέρωσης του συρραφής νάιλον στύγμα μετά τη συλλογή παθογόνων ήταν σχεδόν παρόμοια με εκείνη της ομάδας θετικού ελέγχου χωρίς Swab σε διαφορετικές συγκεντρώσεις αραίωσης. Ενώ η αποτελεσματικότητα απελευθέρωσης των παθογόνων που συλλέχθηκαν από τα βαμβακερά επιχρίσματα ήταν σημαντικά χαμηλότερη και τα αποτελέσματα επηρεάστηκαν περισσότερο από τη συγκέντρωση αραίωσης.

(2) Ασφάλεια του στυλοβάθμιας στο ανθρώπινο σώμα

Η τακτική παρακολούθηση της πανδημίας έχει καταστήσει τον έλεγχο του νουκλεϊκού οξέος ένα καθημερινό μέρος της ζωής, με τρεις ή τέσσερις δοκιμές την εβδομάδα και ακόμη και κάποιο προσωπικό της βιομηχανίας των υπηρεσιών πρέπει να διεξάγει καθημερινές δοκιμές νουκλεϊκού οξέος, όπου τα επιχρίσματα πρέπει να έρθουν σε άμεση επαφή με τον στοματικό και ρινικό βλεννογόνο, οπότε η ασφάλεια του Swab δεν μπορεί να αγνοηθεί.

ISO 10993-10: 2010 Βιολογική αξιολόγηση των ιατρικών συσκευών - Μέρος 10: Οι δοκιμές για ερεθισμό και ευαισθητοποίηση του δέρματος αξιολογούν τη βιοασφάλειας των επιχρισμάτων δειγματοληψίας από τρεις ξεχωριστές διαστάσεις, δηλαδή τον ερεθισμό της κυτταροτοξικότητας , του δέρματος και την ευαισθητοποίηση του δέρματος , για να μας βοηθήσουν να επιλέξουμε τα επιχρίσματα δειγματοληψίας που είναι ασφαλείς για το ανθρώπινο σώμα.

Iii. Τεχνικές προδιαγραφές του σωλήνα δειγματοληψίας ιού

Τα δείγματα στυλοβάτη που αποθηκεύονται στον σωλήνα δειγματοληψίας του ιού πρέπει να σταλούν στο μοριακό εργαστήριο για ανίχνευση νουκλεϊκού οξέος. Δεδομένου ότι το γενετικό υλικό του COVID-19 είναι RNA, το οποίο είναι εξαιρετικά ασταθές στη φύση και εύκολα υποβαθμισμένη σε πολύ υψηλή θερμοκρασία και τα ένζυμα νουκλεάσης που βρέθηκαν παντού μπορούν επίσης να προκαλέσουν την υποβάθμισή του. Επομένως, η ικανότητα των σωλήνων δειγματοληψίας να διατηρηθούν σταθερά το RNA του ιού γίνεται το κλειδί για την ακρίβεια των δοκιμών νουκλεϊκού οξέος.

Η ποιότητα του σωλήνα δειγματοληψίας δεν είναι μόνο θέμα των ορατών δεικτών, αλλά το πιο σημαντικό, οι αόρατοι δείκτες. Οι ορατοί δείκτες περιλαμβάνουν τους άμεσα παρατηρήσιμους δείκτες ποιότητας, όπως το υλικό του σωλήνα δειγματοληψίας, το επίπεδο διεργασίας, τη σφράγιση και την ακρίβεια πλήρωσης. Οι αόρατοι δείκτες περιλαμβάνουν την επίδραση συντήρησης του ιικού νουκλεϊκού οξέος, την επίδραση του ελάχιστου ορίου ανίχνευσης, τους μικροβιακούς δείκτες, την αποτελεσματικότητα της απενεργοποίησης του ιού κλπ. Αυτοί οι δείκτες είναι το κλειδί για τον προσδιορισμό της ανίχνευσης του ιικού νουκλεϊκού οξέος.

Βασικός δείκτης 1: Επίδραση συντήρησης του ιικού νουκλεϊκού οξέος

Ο ιός απενεργοποιείται στον σωλήνα συντήρησης, απελευθερώνοντας το γενετικό υλικό RNA. Το RNA ενός κλώνου είναι εξαιρετικά ασταθές in vitro, το οποίο είναι εξαιρετικά επιρρεπές σε υποβάθμιση και υδρόλυση. Ο ρόλος του διαλύματος διατήρησης του ιού είναι η διατήρηση της ακεραιότητας του ιικού RNA και η αναστολή της αποικοδόμησης και της υδρόλυσης. Η θερμοκρασία, οι συνθήκες μεταφοράς και οι ημέρες αποθήκευσης θα επηρεάσουν όλες την ακεραιότητα του RNA. Όσο καλύτερη είναι η προστασία του RNA, τόσο πιο ακριβής είναι η ανίχνευση νουκλεϊκού οξέος του ιού.

Η απόδοση διατήρησης διαφορετικών σωλήνων δειγματοληψίας ιών ποικίλλει σε μεγάλο βαθμό. Οι παραπάνω δύο μάρκες σωλήνων δειγματοληψίας, Α και D, έχουν δοκιμάσει τα αποτελέσματα ανίχνευσης νουκλεϊκού οξέος των ιών που αποθηκεύονται στους 4 ° C, 25 ° C και 37 ° C για 24 ώρες αντίστοιχα. Η τιμή CT του σωλήνα συντήρησης Α έχει σχεδόν αμετάβλητη από εκείνη της μόνο δειγματοληψίας, υποδεικνύοντας ότι το αποτέλεσμα συντήρησης είναι καλό, ενώ το ιικό νουκλεϊκό οξύ δεν μπορούσε να ανιχνευθεί στον σωλήνα συντήρησης D από την 4η ^ώρα .

Βασικός δείκτης 2: Επίδραση συντήρησης στο ελάχιστο όριο ανίχνευσης

Ο σκοπός αυτού του δείκτη είναι να διασφαλιστεί ότι τα δείγματα με χαμηλό ιικό φορτίο μπορούν να ανιχνευθούν χωρίς ψευδή αρνητική εκτίμηση.

Η εθνική απαίτηση είναι ότι η ευαισθησία ανίχνευσης του COVID-19 δεν πρέπει να είναι υψηλότερη από 500 αντίτυπα/mL. Με άλλα λόγια, εφόσον η συγκέντρωση του δείγματος δεν είναι χαμηλότερη από 500 αντίτυπα/mL, θα πρέπει να ανιχνευθεί. Ωστόσο, η πραγματικότητα είναι ότι μετά από εξέταση πληθυσμού μεγάλης κλίμακας ή δειγματοληψία νουκλεϊκού οξέος σε απομακρυσμένες περιοχές, τα δείγματα δεν μπορούν να σταλούν αμέσως στο εργαστήριο για δοκιμές. Τα δείγματα με χαμηλό ιικό φορτίο μπορούν να υποβαθμιστούν σοβαρά στη συγκέντρωση κάτω από 500 αντίτυπα/mL, με αποτέλεσμα τις χαμένες δοκιμές, δηλαδή, ψευδή αρνητικά αποτελέσματα δοκιμών.

Δείκτης κλειδιού 3: μικροβιακές δείκτες

Οι σωλήνες δειγματοληψίας ιού πρέπει να κατασκευάζονται με διαδικασία μη τοξικής συσκευασίας και ακτινοβολίας. Τα συνολικά αερόβια βακτήρια (CFU/ml) ≤ 200; και συνολικά μούχλα και ζύμη (CFU/ml) ≤ 100 απαιτούνται.

Το υγρό στον σωλήνα δειγματοληψίας του ιού είναι το διάλυμα συντήρησης του ιού, στο οποίο προστίθεται ο δείκτης χρώματος φαινόλης κόκκινου. Υπό κανονικές συνθήκες, το υγρό πρέπει να είναι αλκαλικό και μοβ κόκκινο χρώμα. Μόλις ο μικροοργανισμός στον σωλήνα δειγματοληψίας δεν ανταποκρίνεται στην απαίτηση, η αναπαραγωγή του θα προκαλέσει τη μείωση της τιμής του ρΗ του υγρού και το διάλυμα συντήρησης θα μετατραπεί από κόκκινο σε κίτρινο. Μπορεί να κρίνει οπτικά εάν ο μικροοργανισμός φτάνει στην απαίτηση μέσω του υγρού χρώματος του σωλήνα. Η παρουσία μικροοργανισμών θα επιταχύνει την υποβάθμιση του ιικού RNA και θα επηρεάσει την ευαισθησία της ανίχνευσης νουκλεϊκού οξέος.

Βασικός δείκτης 4: Αποδοτικότητα αδρανοποίησης του ιού

Σύμφωνα με την ειδοποίηση στο βιβλίο εργασίας για τη δοκιμή νουκλεϊκού οξέος SARS-COV-2 σε ιατρικά ιδρύματα (δοκιμαστική έκδοση 2), ο έλεγχος του πληθυσμού πρέπει να επιλέξει τον σωλήνα δειγματοληψίας με τη λειτουργία της απενεργοποίησης του ιού, όπως το άλας γουανιδίνης (ισοθειοκυανική γουανιδίνη ή υδροχλωρική γουανιδίνη κ.λπ.) ή επιφανειακή. Οι λύσεις συντήρησης δείγματος που απενεργοποιούν άμεσα τον ιό είναι ιδιαίτερα επιθυμητές για την πρώτη γραμμή της πανδημίας, η οποία μπορεί να βελτιώσει σημαντικά την ασφάλεια της διαδικασίας συλλογής και μεταφοράς δειγμάτων. Πρέπει να έχει υψηλή αποτελεσματικότητα απενεργοποίησης του ιού. Όπως φαίνεται στον ακόλουθο πίνακα, ο σωλήνας συντήρησης του ιού μπορεί να επιτύχει αποτελεσματικότητα απενεργοποίησης ιού 99,99% σε 1 λεπτό.

Σύναψη

Με μια τόσο μεγάλη ζήτηση για δοκιμές και αγορά, θα υπάρχουν αναπόφευκτα προϊόντα τόσο καλών όσο και κακών στην αγορά. Αλλά στον τομέα της διαλογής νουκλεϊνικού οξέος Covid-19, η οποία σχετίζεται με την εθνική οικονομία και το βιοπορισμό των ανθρώπων, η ποιότητα των προϊόντων είναι πιο σημαντική από την τιμή. Θα πρέπει πρώτα να τηρήσουμε την αρχή της ποιότητας, να διασφαλίσουμε την ακρίβεια των δοκιμών νουκλεϊκού οξέος και να μην είναι πέννα σοφή και λίβρα ανόητη.