Εισαγωγή σε μηχανές PCR

Η μηχανή PCR , γνωστή και ως όργανο ενίσχυσης γονιδίου PCR, όργανο ενίσχυσης PCR, όργανο ενίσχυσης του νουκλεϊκού οξέος πολυμεράσης, είναι ένα όργανο που ενισχύει το συγκεκριμένο DNA χρησιμοποιώντας τεχνολογία PCR (αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης). Η μηχανή PCR χρησιμοποιείται ευρέως σε ιατρικά και βιολογικά εργαστήρια, όπως για τον προσδιορισμό του εάν ένα δοκιμαστικό σώμα θα εμφανίζει μηχανές PCR χρησιμοποιούνται ευρέως σε ιατρικά και βιολογικά εργαστήρια, για παράδειγμα, για να προσδιορίσουν εάν ένας δοκιμαστικός οργανισμός παρουσιάζει ένα προφίλ γενετικής νόσου, για τη διάγνωση των μολυσματικών ασθενειών, για να αναπαράγει τα γονίδια και να προσδιορίσει την γονέα. Τι είναι η μηχανή PCR;

Εδώ είναι η λίστα περιεχομένου:

l Η βασική δομή μιας μηχανής PCR

L Λειτουργική αρχή της μηχανής PCR

l Αντίδραση κινητική των μηχανών PCR

Η βασική δομή μιας μηχανής PCR

Ένα μηχάνημα PCR αποτελείται συνήθως από ένα τμήμα καυτού καλύμματος, ένα τμήμα θερμικού κύκλου, ένα τμήμα μετάδοσης, ένα τμήμα ελέγχου και ένα τμήμα τροφοδοσίας κ.λπ.

Αρχή λειτουργίας της μηχανής PCR

Η αρχή λειτουργίας της μηχανής PCR είναι παρόμοια με τη φυσική διαδικασία αναπαραγωγής του DNA, της οποίας η ειδικότητα εξαρτάται από τους ολιγονουκλεοτιδικούς εκκινητές συμπληρωματικούς και στα δύο άκρα της αλληλουχίας στόχου και αποτελείται από τρία βασικά στάδια αντίδρασης: επέκταση μετουσίωσης.

1 μετουσίωση του προτύπου DNA

Το DNA του προτύπου θερμαίνεται σε περίπου 93 ° C για ένα συγκεκριμένο χρονικό διάστημα για να διαχωρίσει το DNA διπλά έλικας προτύπου ή το διπλό έλικες DNA που σχηματίζεται από μια μηχανή PCR για να το κάνει μονόκλωνο έτσι ώστε να μπορεί να δεσμεύεται με τους εκκινητές σε προετοιμασία για τον επόμενο γύρο αντίδρασης.

2. Ανόπτηση (μετουσίωση) του προτύπου DNA και των εκκινητών

Αφού το DNA του προτύπου μετουσιωμένο σε μονό έλλειμμα με θέρμανση, η θερμοκρασία μειώνεται σε περίπου 55 ° C και οι εκκινητές συνδυάζονται και δεσμεύονται με τη συμπληρωματική αλληλουχία του προτύπου DNA.

3. Επέκταση των εκκινητών

Το συζυγές του προτύπου DNA-primer συντίθεται κάτω από τη δράση της πολυμεράσης taqDNA, χρησιμοποιώντας το DNTP ως υλικό αντίδρασης και την αλληλουχία στόχου ως πρότυπο, για να συνθέσει μια νέα ημι-διατηρούμενη αντιγραφή συμπληρωματική προς το πρότυπο DNA της αντιγραφής σύμφωνα με την αρχή της βασικής ζωγραφικής και της ημι-διαχειριζόμενης αντιγραφής.

Με την επανάληψη της διαδικασίας επεκτάσεων-επέκτασης μετουσίωσης, μπορούν να ληφθούν περισσότερα 'ημι-συντηρημένες αλυσίδες αναπαραγωγής ' και αυτές οι νέες αλυσίδες μπορούν να χρησιμοποιηθούν ως πρότυπα για τον επόμενο κύκλο.

Το μηχάνημα PCR διαρκεί 2 ~ 4 λεπτά για να ολοκληρωθεί κάθε κύκλος και ούτω καθεξής, το DNA που παράγεται σε κάθε κύκλο μπορεί να γίνει το πρότυπο για τον επόμενο κύκλο και κάθε κύκλος ενισχύει τον αριθμό αντιγράφων της συγκεκριμένης περιοχής DNA μεταξύ δύο συνθετικών εκκινητών με 1 φορές και το προϊόν PCR ενισχύεται γρήγορα στην εκθετική μορφή του 2 μετά από 25 ~ 109-Fold μετά από 3 ~ 3 ώρες). 25 ~ 30 γύρους (2 ~ 3 ώρες), και στην πράξη μπορεί γενικά να φτάσει τα 106 ~ 107 φορές.

Κινητική αντίδρασης της μηχανής PCR

Τα τρία στάδια αντίδρασης της μηχανής PCR επαναλαμβάνονται, με αποτέλεσμα μια εκθετική αύξηση της ποσότητας ενίσχυσης του DNA. Η τελική ενίσχυση του DNA της αντίδρασης μπορεί να υπολογιστεί χρησιμοποιώντας y = (1+x) n. Το y αντιπροσωπεύει τον αριθμό των αντιγράφων του θραύσματος DNA που ενισχύεται, το x αντιπροσωπεύει τη μέση απόδοση ενίσχυσης ανά ενίσχυση και το Ν αντιπροσωπεύει τον αριθμό των κύκλων. Η θεωρητική τιμή της μέσης απόδοσης ενίσχυσης είναι 100%, αλλά στο αρχικό στάδιο της πραγματικής αντίδρασης, η αύξηση του θραύσματος DNA της αλληλουχίας στόχου είναι εκθετική και με τη σταδιακή συσσώρευση των προϊόντων μηχανής PCR, το ενισχυμένο θραύσμα DNA δεν αυξάνεται εκθετικά, αλλά εισέρχεται στη γραμμική περίοδο ανάπτυξης ή στη στάσιμη περίοδο, το Μηχανικό 'Stagnation Effect ' έτσι ώστε να είναι η μέση απόδοση του μέσου όρου του Η μηχανή PCR δεν φτάνει στη θεωρητική τιμή.

Bioteke Corporation, η οποία επικεντρώνεται στη μοριακή διάγνωση και την ταχεία ανίχνευση, ιδιαίτερα στην εκχύλιση νουκλεϊκών οξέων, είναι ένας επαγγελματίας κατασκευαστής υψηλής τεχνολογίας και μηχανές PCR. Βρίσκεται στην πόλη Wuxi, στην επαρχία Jiangsu της Κίνας. Έτσι, ανυπομονούμε να συνεργαστούμε μαζί σας.